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抗原特异性T细胞检测的金标准【1】【2】

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MHC四聚体(MHC Tetramer)是一类用于直接捕获抗原特异性T细胞的免疫学试剂,

由四个MHC-peptide单体组成,具有亲和力高、特异性强等特点。


[1] Christophersen A. Peptide-MHC class I and class II tetramers: From flow to mass cytometry. HLA. 2020 Mar;95(3):169-178.

[2] Dolton G., Zervoudi E., Rius C. Optimized Peptide-MHC Multimer Protocols for Detection and Isolation of Autoimmune T-Cells. Front Immunol. 2018 Jun 29;9:1378.


与其他应用于T细胞检测的传统方法相比,如酶联免疫斑点检测(ELISPOT)、胞内细胞因子染色(ICS)等,MHC四聚体分析技术具有以下优势:

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应用领域


  • 肿瘤Cancer

    新生抗原/表位肽疫苗
    DC疫苗/CTL细胞回输
    TCR-T疗法等

  • 传染病Infections diseases

    新冠病毒/流感病毒
    巨细胞病毒/艾滋病毒
    EB病毒/结核病等

  • 移植Transplantation

    供体常见病原:
    巨细胞病毒
    EB病毒/腺病毒等

  • 自身免疫疾病
    Autoimmune diseases

    糖尿病/过敏
    类风湿性关节炎等

MHC四聚体的技术优势

MHC TetramerFunctional analysis
(ELISPOT、ICS ect.)

  


     特异性          


直接识别抗原肽特异性CD8+T细胞表面TCR, 更直观

通过细胞因子释放等功能学检测,间接确认抗原肽

特异性CD8+T细胞[1]



灵敏度



通过大量实验证明,四聚体与抗原肽特异性CD8+T细胞的TCR亲和力高,且本底背景低, 具有较高检测灵敏度检测时,仅识别具有分泌特定细胞因子能力的淋巴细胞,但这些淋巴细胞仅是抗原肽特异性CD8+T细胞中的一部分,从而影响了的灵敏度[2]


  

   检测速度          

   

无需抗原肽刺激及扩培,配合流式,3-4h内 完成检测,更高效需抗原肽刺激及扩培,整个实验需2-3天, 且易引入偏歧[3]

  


 个性化定制                  

     

Helixgen可提供60余种MHC Allele(涵盖人、小鼠、猕猴、大猩猩、小鼠等物种)定制化服务,满足客户个性化研发需求通过常规细胞因子检测,无法做到个性化
[1] Schwarz M., Mzoughi S., Lozano-Ojalvo D. et al., T cell immunity is key to the pandemic endgame: How to measure and monitor it. Current Research in Immunology 3 (2022) 215-221.
[2] Philippe Bousso P. Generation of MHC-peptide tetramers: a new opportunity for dissecting T-cell immune responses. Microbes and Infection, 2, 2000, 425−429
[3]Lacey S.F., Diamond D.F. Assessment of Cellular Immunity to Human Cytomegalovirus in Recipients of Allogeneic Stem Cell Transplants. Biology of Blood and Marrow Transplantation 10:433-447 (2004)

操作流程

流式检测结果图


MHC Tetramer产品

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  • HelixGen MHC四聚体是由涵盖人、小鼠、各种病原微生物等多种类型的抗原肽制备的即用型试剂,目前已有400余种。






 




    

热点应用

CMV  /  EBV  /  AdV  /  HSV  /   HHV / VZV / Influenza  /  HTLV-1  /  HIV  /  HBV  / HCV /  HPV  /  M.tuberculosis

WT1  /  gp100  /  Mart-1  p53  / Her-2   

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应用专题


MHC Tetramer定制服务

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  • 我们可根据您指定的亚型及多肽进行个性化定制
  • 丰富的MHC Class | 亚型库





 




    

    人    :HLA-A、HLA-B、HLA-C等

小    鼠:H-2D(b) 、H-2K(b)、H-2k(d)等

猕    猴:Mamu-A*01、A*02、B*01等

大猩猩:PATRA*0101、A*0401、B*0101等

     猪   :SLA-1*0301

我们可以针对每位客户提供的多肽序列,通过多肽和MHC分子结合的亲和力分析,
制作定制化的四聚体。如果有感兴趣的MHC型和多肽序列,请联系我们。
HumanMurineMacaqueChimpanzeeSwine
HLA-AHLA-BHLA-CHLA-EMICA
HLA-A*0101
HLA-A*0201
HLA-A*0205
HLA-A*0301
HLA-A*1101
HLA-A*2301
HLA-A*2402
HLA-A*2902
HLA-A*3002
HLA-A*31012
HLA-A*68012
HLA-A*7401
HLA-B*0702
HLA-B*0801
HLA-B*1402 (B65)
HLA-B*1501
HLA-B*1503
HLA-B*2705
HLA-B*3501
HLA-B*3502
HLA-B*3503
HLA-B*4402
HLA-B*4501
HLA-B*4601
HLA-B*5101
HLA-B*5301
HLA-B*5701
HLA-B*5703
HLA-B*68
HLA-C*0304
HLA-C*0701
HLA-C*0802
HLA-C*1203
HLA-E*01033MICA 004
MICA 008
H2-Db
H2-Dd
H2-Dk
H2-Kb
H2-Kd
H2-Kk
H2-Ld
Qa1b
Kb.A2
Kb.Ld
A2.Dd
A2.Kb
Mouse HFE
Mamu-A*01
Mamu-A*02
Mamu-A*08
Mamu-A*11
Mamu-B*01
Mamu-B*03
Mamu-B*04
Mamu-B*12
Mamu-B*17
PATR A*0101
PATR A*0401
PATR B*0101
PATR B*0301
PATR B*13
PATR B*2001
PATR B*23
SLA-1*0301 (1*wxd)

Q&A

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  • Q:MHC四聚体产品应该如何保存?
    A:MHC四聚体试剂的储存条件:2-8℃避光保存,切忌冷冻保存。
  • Q:关于四聚体的荧光标记,请问除了APC和PE标记外,有FITC标记的吗?
    A:由于FITC标记的分子太小,实验的效果不好,所以暂不提供FITC标记。
  • Q:MHC四聚体试剂实验中一般要求的细胞数量是多少?
    A:对于新鲜的外周血单核细胞、淋巴细胞、脾细胞,通常建议每个染色样品细胞总数为1-2 ×106;而对于细胞克隆或者CTL细胞系,每个样品细胞总数可减低为2×105。当针对细胞克隆染色时,建议选取具有不同特异性的其它克隆细胞作为阴性对照。
  • Q:如何确定MHC四聚体试剂稀释比例?
    A:在进行大规模试验前,建议先进行预试验,以确定**的MHC四聚体稀释比例。通常,建议MHC四聚体的初始稀释比例为1:100~1:200。请根据具体实验,优化其稀释比例,以期获得**的染色效果。
  • Q:MHC四聚体产品交货日期需要多长时间?
    A:常规产品有现货的是1-2周,定制的6-8周。
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关于我们


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高新生物技术企业,属于康立明全资子公司。公司由具有国际前沿科研经验
的生物技术专家、生物医学工程专家以及具有国际视野的企业管理专家团队
和投资人共同组建,致力于医学诊断产品的研发、生产销售与技术服务。好
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